凝胶成像锌染色原理
百科全书1、凝胶电泳:首先,待分析的蛋白质样品经过SDS-PAGE凝胶电泳分离。SDS-PAGE通过在蛋白质样品中加入类似于十六烷基硫酸钠(SDS)的表面活性剂,使蛋白质带有负电荷,并通过电场作用分离成不同大小的带状物。
2、转移:凝胶电泳完成后,蛋白质通过电泳转移到含有锌离子的转移缓冲液中,这个步骤称为电泳转移。
3、锌染色:在转移缓冲液中加入适量的亚硫酸和硫代硫酸钠,这两种试剂会与锌离子形成由蛋白质分子铁氰化合物组成的沉淀,这称为锌染色。这个沉淀表现为紫蓝色。
4、可视化:经锌染色处理后,可以直接观察到电泳凝胶上的蛋白质带状区域(通常出现紫蓝色的带状区域),这些区域对应着各个分子量的蛋白质。